Конфокальный микроскоп Nikon A1/А1R HD25

Конфокальный микроскоп Nikon А1 HD25 на базе микроскопа Nikon Ti2-E

Конфокальный микроскоп Nikon А1 HD25 позволяет захватывать изображения с полем зрения 25 мм, что почти вдвое превышает площадь обычных конфокальных точечных сканеров. Захват изображений больших образцов, таких как ткани, органы и живые модельные организмы, требует как расширения наблюдаемой области препарата, так и увеличения скорости захвата изображения. Конфокальный микроскоп A1 HD25 / A1R HD25 имеет наибольшее поле зрения в мире (25 мм), что позволяет пользователям расширять пределы научных исследований.

 

Видеть больше чем прежде в конфокальном режиме

При установке на инвертированном микроскопе Nikon Ti2-E, область формирования изображения A1 HD25 / A1R HD25 почти в два раза превышает обычное FOV 18 мм, позволяя пользователю получать значительно больше данных и захватывать большую площадь образца в каждом снимке.

Обычное (18мм) поле зрение конфокального сканера в сравнение с полем зрения сканера Nikon A1 HD25 (25мм)

 

Меньше кадров для сшивки при создании больших изображений с высоким разрешением

Большое поле зрения  микроскопа A1 HD25 / A1R HD25 позволяет уменьшить как необходимое количество кадров для сшивания большого изображения, так и время получения изображения, что обеспечивает эффективную высокопроизводительную визуализацию даже крупномасштабных образцов. Это особенно сказывается при создании 3D (XYZ) реконструкции больших препаратов.

FOV 25мм микроскопа A1 HD25/A1R HD25: всего 24 изображения	FOV 18мм обычного микроскопа: всего 48 изображений

 

Большая производительность при анализе больших объемов данных без ущерба для качества изображений

Комбинация высокоскоростного резонансного сканера и большого поля - это идеальная платформа для скрининга с высоким разрешением, которая позволяет значительно сократить время, необходимое для анализа большого количества образцов при различных условиях съемки.

Выбранная ячейка в 96-ти луночном планшете	Большое поле зрения позволяет получить изображение всей лунки с объективом 4х	Большое поле зрения позволяет измерять большие площади и проводить высокопроизводительный анализ

 

Высокоскоростной резонансный сканер A1RHD25 высокого разрешения (1024х1024)

Новый резонансный сканер позволяет получать изображения с превосходной детализацией на максимальном разрешении 1024 x 1024 пикселей (15 кадр/сек).

Сравнение обзорного снимка с максимальным полем зрения и детализированного изображения тонких структур в просветленном образце 2мм среза мозга мыши.  Изображение предоставлено: Drs. Ryosuke Kawakami, Kohei Otomo, and Tomoni Nemoto, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido

Низкая фототоксичность для живых клеток

Высокая скорость получения изображений до 720 кадров в секунду в сочетании с большим полем зрения значительно увеличивает производительность микроскопа. При такой скорости сканирования уменьшается время экспозиции образца возбуждающим светом, что сводит к минимуму фототоксичность и выгорание.

Гальванический сканер:

 

Резонансный сканер:

Сравнение выгорания флуоресцентных белков при получении изображений с использованием гальванического и резонансного сканеров. Показана серия трехмерных изображений сети сосудов у личинок рыбок данио-рерио, экспрессирующих LIFEACT-mCherry (зонд для F-актина) в эндотелиальных клетках. Изображения получали каждые 30 минут в течение 15 часов с использованием гальвано-сканера (в среднем 2 шт.) и резонансного сканера (в среднем 64 шт.). 1024 x 512 пикселей, 2-кратный зум, 100 изображений в одном Z-стеке Обратите внимание, что выгорание LIFEACT-mCherry резко уменьшается при использовании резонансного сканера. Изображениепредоставлено: Shinya Yuge Ph.D., and Shigetomo Fukuhara, Ph.D., Department of Molecular Pathophysiology, Institute of Advanced Medical Sciences, Nippon Medical School

 

3D-изображение живых клеток

Секреция клеток Панета при ответе на карбахол. Изображение энтероида (трехмерная клеточная культура эпителиальных клеток кишечника) было получено в 4D (XYZt): 61 кадр в одном Z-стеке, 1.98 сек./1 Z-стек, пьезо-столик, резонансный сканер. На видео можно четко наблюдать секрецию клеток Панета в просветах энтероида. Зеленый цвет: Zinpyr-1 (клетки Панета), пурпурный цвет: CellMaskTM Deep Red (плазматическая мембрана). Длина волны возбуждения: 488нм, 638нм. Разрешение: 1024 × 512 пикселей. Изображение предоставлено: Dr. Yuki Yokoi, Dr. Kiminori Nakamura, Dr. Tokiyoshi Ayabe, Innate immunity Laboratory, Department of Cell Biological Science, Faculty of Advanced Life, Graduate School, Hokkaido University.

Изображение в режиме time-lapse ангиогенеза у эмбрионов рыбок данио-рерио, экспрессирующих LIFEACT-mCherry (зонд для F-актина) и MYR-GFP (зонд для плазматической мембраны) в эндотелиальных клетках. Трехмерные изображения получали каждые 2,5 минуты в течение 14 часов, спустя 22 часа после оплодотворения, используя резонансный сканер (в среднем 64 шт.). 1024 x 1024 пикселей, 2-кратный зум, 68 шт. в одном Z-стеке. Обратите внимание, что можно четко наблюдать быстрое образование и ретракцию эндотелиальных филоподий во время ангиогенеза. Изображение предоставлено: Shinya Yuge Ph.D., and Shigetomo Fukuhara, Ph.D., Department of Molecular Pathophysiology, Institute of Advanced Medical Sciences, Nippon Medical School

 

Макро- и микроизображения превосходного качества

Сканер A1 HD25 / A1R HD25 позволяет захватывать как крупномасштабные обзорные изображения, так и изображения с высоким увеличением. 25-миллиметровое поле зрения эффективно для наблюдения больших образцов, в то время как высокое разрешение 1Kx1K идеально подходит для наблюдения мельчайших структур.

Сшитое обзорное изображение мозга мармосета, снятое с помощью объектива CFI Plan Apochromat Lambda 10X и детальное изображение дендритных шипиков, снятое с помощью объектива CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil

 

Высокочувствительные детекторы для различных типов флуоресцентных меток

Детектор GaAsP A1-DUG-2

A1-DUG-2 - это 4-канальный детектор, оснащенный высокочувствительными GaAsP ФЭУ, которые позволяют получать яркие сигналы с минимальным фоновым шумом, даже если флуоресценция слабая или детектор используется с высокоскоростным резонансным сканером.

Изображения клеток HeLa, помеченных MitoTracker, вместе с их поверхностными графиками интенсивности. Интенсивности флуоресценции указаны вместе с цветами и высотами в трехмерном графике. Заметны значительные различия между GaAsPФЭУ (слева) и обычным ФЭУ (справа) по уровню фонового шума.

 

Детектор GaAsP A1-DUVB-2

A1-DUVB-2 оснащен высокочувствительным GaAsP ФЭУ и позволяет получать спектральные изображения с использованием как гальванического, так и резонансного сканеров. Это полностью настраиваемый блок детекции эмиссии флуоресцентных меток, способный осуществлять спектральное разделение с точностью до 10 нм. Детектор позволяет опциональную  установку второго канала детекции с фиксированной областью детектирования, что дает возможность осуществлять регистрацию спектральных изображений  одновременно по двум каналам.

Клетки HeLa с пятью флуоресцентными метками, ядра: DAPI, виментин: Alexa Fluor® 488, ламин: ® 568, тубулин: ® 594, актин: Alexa Fluor® 633 Изображение снято с помощью детектора A1-DUVB-2 Изображенияпредоставлены: Dr. Tadashi Karashima, Department of Dermatology, Kurume University School of Medicine

 

Спектральный детектор A1-DUS

А1-DUS может получать спектральные изображения с разрешением до 2,5 нм. 32 канала спектров флуоресценции (с шириной детектируемого диапазона до 320 нм) могут быть получены с помощью одного сканирования, что обеспечивает быструю визуализацию с частотой до 24 кадров в секунду (512 х 32 пикселя). Одновременное возбуждение с использованием до четырех лазеров позволяет получать спектральные изображения в более широком спектральном диапазоне.

Детектор точно разделяет близко перекрывающиеся спектры флуоресцентных меток и убирает автофлуоресценцию. Разделение сигналов в режиме реального времени очень эффективно для экспериментов FRET.

Изображение 5-ти цветных флуоресцентных меченых клеток HeLa. Сигналы  разделены с помощью спектрального детектора A1-DUSИзображения предоставлены: Dr. Tadashi Karashima, Department of Dermatology, Kurume University School of Medicine

Для каждого из 32-х каналов спектрального детектора A1-DUS возможно их объединение, с созданием более широких виртуальных каналов, которые в точности соответствуют спектрам испускания используемых флуорохромов.

 

 

Превосходные оптические технологии для поддержки любых конфокальных приложений 

Nikon предлагает широкий спектр объективов с высокой числовой апертурой (NA) и прекрасным качеством изображения для расширения границ конфокальной визуализации. Доступны объективы силиконовой иммерсии для толстых препаратов с живыми клетками, малых увеличений с большим полем зрения и простые в использовании высокоапертурные сухие объективы. Хроматические аберрации скорректированы от ультрафиолетового до ближнего инфракрасного диапазона, обеспечивая отличную визуализацию нескольких флуоресцентных меток одновременно.

 

	Детальное изображение глубоких слоев гиппокампа, очищенного с помощью RapiClear / SunJinLab и снятого с помощью объектива CFIApochromatLWDLambdaS 20XCWI
	Нейронная сеть (зеленый) и кровеносный сосуд (пурпурный) спинного мозга, очищенные с помощью RapiClear / SunJin Lab, объектив CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI

 Высокоскоростная визуализация живых клеток во время фотостимуляции

Новый модуль фотостимуляции системы Ti2-LAPP позволяет осуществлять точечное сканирование для стимуляции областей, заданных пользователем. При этом с помощью сканера A1 HD25 / A1R HD25 можно синхронно получать конфокальные изображения стимулируемых областей образца. Модуль DMD позволяет одновременно стимулировать несколько областей любой заданной пользователем формы.
	Сканер Nikon A1 HD25 / A1R HD25 позволяет проводить эксперименты с фотостимуляцией и одновременным получением изображения

 

Единое программное обеспечение для сбора и анализа данных

NIS-Elements C – это  унифицированная программная платформа Nikon, которая обеспечивает интуитивно понятный рабочий процесс конфокальной визуализации. Благодаря инструментам графического программирования для автоматизации захвата изображений и их анализа, рабочая среда может быть полностью настроена для любого типа эксперимента.

 

Программный пакет NIS-Elements C-ER

Данный пакет позволяет генерировать изображения с более высоким разрешением одним щелчком мыши. NIS-Elements C-ER анализирует полученное изображение и автоматически определяет параметры обработки для достижения большего разрешения. Уникальная технология обработки изображений увеличивает разрешение по сравнению с обычным конфокальным изображением в 1,5 раза (по XY) и в 1,7 раза (по Z).

Изображениепредоставлено: Drs. Yutaro Kashiwagi and Shigeo Okabe, Department of Cellular Neurobiology, Graduate School of Medicine and Faculty of Medicine, The University of Tokyo.

 

Программный пакет NIS-Elements HC (для высокопроизводительного анализа)

Благодаря полностью автоматизированному сбору и анализу большого количества изображений, снятых в разных режимах, пакет HCA позволяет быстро настроить эксперимент любой сложности. Пакет позволяет мгновенных просмотр получаемых при сканировании многолуночного планшета данных с возможностью настройки вида выводимых результатов.

 

Программный пакет JOBS

Пакет позволяет легко создавать сложные и настраиваемые экспериментальные шаблоны, как для захвата изображений, так и для их анализа, без необходимости передовых знаний в области программирования.
JOBS позволяет автоматизировать такие процессы как анализ полученных изображений и данных, а также отображение результатов. Это повышает эффективность работы и сокращает время, необходимое для сбора, анализа и получения данных.